Ланге проба

Определение ацетоновых тел (проба Ланге)

Ланге проба

К ацетоновым теламотносятся ацетон, ацетоноуксуснаякислота и оксимасляная кислота. В мочевстречаются совместно, поэтому раздельноеих определение клинического значенияне имеет. В норме в моче не содержатся.

Реактивы:

– смесь нитропрусидногонатрия с сернокислым аммонием;

– раствор аммиака.

Ход определения:

В пробирку насыпаютнемного, так чтобы было покрыто днонитропрусидной смеси, и приливают 5 мл мочи, взбалтывают и осторожно наслаивают2 мл аммиака. Фиолетово-красное кольцо,появившееся на границе двух жидкостей,свидетельствует о наличии в моче ацетона.

Определение билирубина (проба Розина)

Качественнаяреакция основана на превращениибилирубина под воздействием окислителей(йода) в биливердин зеленого цвета.

Реактивы:

– раствор Люголяили 1% спиртовой раствор йода.

Ход определения:

На 3 – 4 мл мочиосторожно наслаивают 1 – 2 мл 1% спиртовогораствора йода или раствора Люголя. Приналичии желчных пигментов (билирубина)на границе жидкостей появляется зеленоекольцо.

0ценка:В норме билирубин в моче не содержится.

Определение уробилина (проба Флоренса)

Реактивы:

– концентрированнаясерная кислота;

– эфир;

– концентрированнаясоляная кислота.

Ход определения:

К 10 мл мочи добавляют3 – 4 капли концентрированной сернойкислоты, смешивают, приливают 2 – 3 млэфира, пробирку закрывают резиновойпробкой и осторожно

смешивают, невзбалтывая. В другую пробирку наливают2 мл концентрированной соляной кислоты.Пипеткой отсасывают из первой пробиркиэфирный слой и наслаивают его на солянуюкислоту. На границе жидкостей при наличииуробилина образуется красно-фиолетовоекольцо различной интенсивности.

Микроскопическоеисследование

Приготовлениепрепарата:

В центрифужнуюпробирку наливают 10 – 15 мл мочи ицентрифугируют при 1000 – 1500 об/мин. 10минут.

После центрифугирования пробиркубыстро опрокидывают для удалениянадосадочной жидкости, затем переводятв исходное положение, чтобы осадокостался на дне.

Пастеровской пипеткойосадок размешивают, небольшую каплюосадка помещают на предметное стеклои накрывают покровным. Микроскопияпроизводится сначала под малым, а затемпод большим увеличением.

Элементы мочевого осадка

Различаюторганизованный (эритроциты, лейкоциты,эпителиальные клетки, цилиндры) инеорганизованный осадок (соли).

Организованныйосадок:

Эритроциты могутбыть неизмененные в виде дисковжелтовато-зеленоватого цвета, содержащихгемоглобин, и измененные (выщелоченные),свободные от гемоглобина, бесцветные,имеющие вид одноконтурных или двухконтурныхколец. В норме содержатся

единичные эритроцитыв препарате. Лейкоциты обнаруживаютсяв моче в виде небольших зернистых клетокправильной округлой формы серого цвета.Лейкоциты в моче представлены нейтрофиламии содержатся в небольшом количестве внормальной моче до 2000000 в сутки). Видоизмененные лейкоциты, так называемыеклетки Штернгеймера- Мальбина.

Длявыявления их после центрифугированияк осадку прибавляют 1 – 2 капли краски,предложенной Штернгеймером и Мальбиным,размешивают, каплю берут на предметноестекло, покрывают покровным имикроскопируют.

Клетки Штернгеймера-Мальбинав 2-3 раза больше обычных лейкоцитов,бледно-синие с бледно-синим илибледно-фиолетовым ядром, в цитоплазмезаметно движение гранул.

Клетки эпителия:

Плоский эпителий- большие (в 3 – 4 раза больше лейкоцитов),широкие полигональные клетки с однимядром и мелкозернистой цитоплазмой.Встречаются группами и пластами. Наличиеэтих клеток в моче не имеет особогодиагностического значения.

Клетки круглогоэпителия -довольно крупные, правильной округлойили овальной формы с гомогенной илимелкозернистой протоплазмой и небольшимядром. В нормальной моче – единичные.

Почечный эпителий– небольшие круглые или кубическиеклетки с большим пузыриковидным ядроми слегка зернистой протоплазмой. Внормальной моче не обнаруживаются.

Цилиндры– белковые или клеточные образованияканальцевого происхождения, имеютцилиндрическую форму. В нормальной мочеможет быть небольшое количество толькогиалиновых цилиндров (2000 за сутки).

Гиалиновыецилиндры -слепки белка, нежные, бледные, почтипрозрачные образования, прямые и извитые,концы их закруглены или неправильнообломаны.

Зернистыецилиндры -короткие широкие – состоят из зерен различной величины, имеют темный, частожелто-коричневый цвет.

Восковидныецилиндры -очень толстые, короткие с желтоватымцветом воска, хорошо контурированы.

Эпителиальныецилиндрыимеют четкие контуры, состоят из клетокпочечного эпителия.

Эритроцитарныецилиндры -желтого цвета, состоят из массыэритроцитов. Цилиндроиды похожи нагиалиновые цилиндры, но не имеютпродольной исчерченности, контуры ихнеправильные, концы раздваиваются.

Кроме того, восадке могут быть: сперматозоиды,бактерии, дрожжевые и другие грибки.

Неорганизованныйосадок:

В кислоймоче встречаются:

Мочевая кислота- кристаллы разнообразной формы(ромбической, шестигранной, в видебочонков, брусков и др.), окрашенные вкрасно-бурый или желтовато-бурый цвет.Микроскопические кристаллы в осадкемочи имеют вид золотистого песка.

Ураты – аморфныемочекислые соли – мелкие желтоватые,часто склеенные группами зернышки.Микроскопически ураты имеют вид плотногокирпично-розового осадка.

Оксалаты – бесцветныекристаллы в форме почтовых конвертов- октаэдров.

Сернокислаяизвесть – тонкие, бесцветные иглы илирозетки. В щелочной и нейтрального моче встречаются:

Фосфаты – аморфныемассы солей сероватого цвета(мелкозернистые). Микроскопически -осадок белого цвета.

Трипельфосфаты- бесцветные яркие кристаллы в видегробовых крышек или длинных призм.

Мочекислый аммоний- желтые непрозрачные шары с шипами наповерхности.

Функциональныепробы почек и количественный метод определения форменных элементов

Источник: https://StudFiles.net/preview/548375/page:3/

Кетоновые тела в моче. Методы определения

Кетоновые тела в моче. Методы определения

К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная кислота и бета-оксимаслянная кислота. Кетоновые тела в моче встречаются совместно, поэтому раздельное определение их клинического значения не имеет.

В норме с мочой выделяется 20 — 50 мг кетоновых тел в сутки, которые не обнаруживаются обычными качественными реакциями, при повышении кетоновых тел в моче качественные реакции на них становятся положительными.

См. также: Кетоновые тела в моче. Клинико-диагностическое значение.

Принцип обнаружения кетоновых тел в моче. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами, образуя комплекс, окрашенный в розовато-сиреневый, сиреневый или фиолетовый цвет. Чувствительность проб около 50 мг/л кетоновых тел. Полуколичественную оценку результатов можно дать в интервале от 150 до 1500 мг/л.

К методам определения кетоновых тел в моче относятся:

  • Проба Ланге
  • Модифицированная проба Ротеры
  • Проба Легаля
  • Проба Лестраде
  • Экспресс-тесты
  1. Уксусная кислота 80%.
  2. Нитропруссид натрия (свежеприготовленный 10% раствор).
  3. Аммиак.

К 12 – 15 мл мочи приливают около 1 мл уксусной кислоты и около 0,5 мл раствора нитропруссида натрия. Затем наслаивают аммиак. В положительном случае на границе двух жидкостей образуется фиолетовое кольцо. Кольцо может появиться не сразу, а в течение 2 – 3 мин.

Другая модификация этой пробы удобна тем, что можно использовать готовый реактив нитропруссида натрия.

Приготовление реактива

6 г нитропруссида натрия растворяют в 100 мл 30% уксусной кислоты.

Ход определения

К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива (до цвета чая) и наслаивают аммиак. В положительном случае на границе жидкостей появляется фиолетовое кольцо.

  • Нитропруссид натрия, раствор 50 г/л; готовят перед употреблением.
  • Аммония сульфат.
  • Аммиак водный – 25% раствор.

Приблизительно 200 мг сухого сульфата аммония, 5 капель мочи и 2 капли раствора нитропруссида натрия тщательно смешивают в пробирке, а затем на эту смесь тщательно наслаивают 10 – 15 капель раствора водного аммиака.

При наличии кетоновых тел на границе раздела в течение 3 – 5 мин образуется красно-фиолетовое кольцо, интенсивность окраски которого позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче (см. таблицу).

Ориентировочная количественная оценка кетоновых тел в моче.

Интенсивность окраски Обнаруживаемые вещества, г/л Ацетоуксусная кислота
Следы 0,05
Умеренная 0,3
Интенсивная 0,8

При незначительной концентрации кетоновых тел слабое кольцо может появиться на 8 – 10 минуте.

  • Свежеприготовленный 5% водный раствор нитропруссида натрия.
  • 10 – 15% раствор едкого натрия.
  • Уксусная кислота ледяная.

К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива № 1 и 0,5 мл реактива № 2. Получается красное окрашивание. Добавляют 0,5 – 1 мл реактива № 3. Если красный цвет исчезает, проба отрицательная, если сохраняется – положительная. Если получается слабо-розовая окраска, то проба считается также положительной.

Проба Лестраде – определение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива (или таблеток).

Реактивы

Приготовление сухого реактива: нитропруссида натрия 1 г, сульфата аммония 20 г, карбоната натрия безводного 20 г. Отвешенные реактивы тщательно растирают в ступке до получения мелкого однородного порошка. Порошок хранят в хорошо закупоренной стеклянной банке в сухом месте.

Ход исследования

Предметное стекло кладут на лист фильтровальной бумаги. На стекло помещают небольшое количество (на кончике ножа) сухого реактива или таблетку и наносят на него 2 – 3 капли мочи. При наличии кетоновых тел получается окрашивание от розового до темно-фиолетового (появление окраски может наступить в течение 2 – 3 мин).

К экспресс-тестам определения кетоновых тел в моче относятся: набор для экспресс-анализа ацетона в моче и диагностические полоски. Исследование проводится согласно инструкции.

При оценке результатов проб на кетоновые тела в моче следует учитывать ряд факторов. Так, например, известно, что ацетоуксусная кислота в стерильной моче стабильна до 8 — 10 дней, при бактериурии или большом количестве дрожжевого грибка может полностью исчезнуть в течение 24 часов.

Около 20% ацетона при комнатной температуре исчезает за 24 часа, но сохраняется в холодильнике. Поэтому важное значение имеет правильный сбор мочи, ее хранение и сроки выполнения анализа.

Кроме того, кетоновые тела могут исчезать из мочи при бактериурии и in vivo, что может привести к ложноотрицательным результатам.

К ложноположительным результатам может привести использование месны, фенолфталеина, метаболитов некоторых препаратов (например, леводопы и каптоприла); кислая моча, повышенный удельный вес мочи.

Все эти факторы приводят к химическому завышению результатов анализа, то есть непосредственно влияют на химическую реакцию определения кетоновых тел в моче, а количество самих кетоновых тел в моче может быть нормальным.

Необходимо помнить, что существуют также факторы, приводящие к клиническому повышению кетоновых тел в моче, то есть непосредственно влияющих на их уровень в моче за счет воздействия на обменные процессы, связанные с образованием кетоновых тел. К таким фактором относится прием некоторых лекарственных препаратов — инозитола, метионина, метформина, фенформина, феназопиридина, эфирного наркоза, интоксикация изониазидом, изопропиловым спиртом, ацетилсалициловой кислотой.

  • Справочник по клиническим лабораторным методам исследования под ред. Е. А. Кост. Москва “Медицина” 1975 г.
  • Морозова В. Т., Миронова И. И., Марцишевская Р. Л. – Исследование мочи — Москва, РМАПО, 1996 г.
  • Клиническая лабораторная аналитика – под редакцией Меньшикова В. В. Том III — Частные аналитические технологии в клинической лаборатории. – Москва, Лабпресс, 2000 г.

Источник: http://www.clinlab.info/Urinalysis/Ketone-bodies-in-urine-74

Этиловый спирт или метиловый: как определить

Этиловый спирт или метиловый: как определить

Алкогольные напитки – коньяк, вино, текила, водка пиво и другие – представляют собой на глубоком химическом уровне смесь этилового спирта с различными добавками, которыми служат вода, растительные экстракты, ароматизаторы, красящие вещества и т. д. Именно этиловый спирт, предназначенный для пищевых и медицинских целей, является основой всех качественных горячительных напитков – но не суррогатов.

Суррогатное зелье производят на основе метилового спирта – вещества из той же химико-органической группы. Но для человеческого организма он является чистым ядом. Визуально отличить эти два вещества очень сложно, поэтому распространены случаи тяжелейших отравлений. Чтобы не подвергнуть свой организм такому испытанию очень важно уметь отличать относительно безопасный этанол от метанола.

Метанол и этанол – яд и депрессант

Этиловый спирт, вещество с химической формулой C2H5OH, является депрессантом, который присутствует во всех алкогольных напитках. Именно поэтому их употребление вызывает опьяняющий эффект.

Этанол еще называют медицинским спиртом или пищевым, так как в небольшом количестве он не несет угрозы здоровью человека.

Правда, длительное употребление напитков на основе этанола ведет к формированию зависимости к нему.

Получают этиловый спирт в результате перегонки раствора, предварительно подвергнутого брожению. Так, образуется вещество высокой концентрации, которое перед употреблением обязательно разбавляют водой, в противном случае возможен ожог слизистой горла, рта и пищевода. Натуральный самогон можно получить и в домашних условиях с помощью специального самогонного аппарата.

Метиловый спирт, одноатомное вещество с химической формулой CH3OH, действует на человеческий организм подобно яду. Добывают вещество из лигнина, муравьиной кислоты и древесины.

Метанол применяют в промышленной сфере как растворителя для красок. Также его используют в процессе производства формальдегида.

Всасывание метилового спирта происходит намного медленнее, чем всасывание этанола, в связи с этим в процессе окисления в организме образуются крайне токсичные вещества.

Именно поэтому метанол действует угнетающе на нервную систему, оказывает негативное воздействие на глазную сетчатку. В результате приема недоброкачественного алкоголя люди часто слепнут. Употребление метилового спирта вместо этилового может привести к серьезному отравлению. Даже небольшие дозы могут стать причиной летального исхода.

Проба Ланга – показатель качества спирта

Произвести пробу Ланга можно самостоятельно в домашних условиях, для этого нужно выполнить ряд манипуляций, описанных ниже.

В емкость подходящую для постоянного нагревания налить 50 мл спирта и 2 мл раствора перманганата калия (вещество, известное в народе, как марганцовка). Приготовить раствор марганцовки можно, разведя в дистиллированной воде 0,2 г порошка.

Нагреть спирт до 18°C, затем добавить марганцовый раствор и все тщательно перемешать.

Далее необходимо засечь время, за которое смесь сменит свой фиолетовый окрас до желто-розового.

Показатель Ланга является показателем уровня качества спирта: чем дольше происходит процесс изменения цвета исследуемой жидкости, тем этот уровень выше. Согласно результатам опытов, проба Ланга считается завершенной, если обесцвечивание медицинского, питьевого спирта длилось не менее 10 минут.

Бытовые способы определения качества напитков

Существует несколько домашних способов проверки напитков на качество. Они помогают определить, какой спирт содержится в алкоголе.

Способ №1. Заполните металлическую кружку на треть исследуемой жидкостью. Емкость поставьте на огонь и опустите в нее термометр. По температуре кипения жидкости можно узнать о ее химическом составе. Метиловый спирт закипит при 64°C, тогда как этиловый – при 78°C.

Способ №2. Кусок медной проволоки раскалите над пламенем, затем опустите его в спирт. Образовавшийся в результате нагревания оксид меди вступит в реакцию с исследуемой жидкостью.

Помимо прочих продуктов взаимодействия в жидкости будет присутствовать альдегид, органическое соединение с характерным запахом. Если спирт этиловый, появится запах уксуса либо прелых яблок.

Если это метанол, пары формалина начнут раздражать слизистую носа.

Результаты бытовых экспериментов с определением химического состава спирта не являются верными на 100%. Точный результат можно получить только путем проведения хроматографического анализа в условиях химической лаборатории.

Способ №3. В прозрачную емкость налейте небольшое количество спирта, добавьте одну щепотку пищевой соды и размешайте. В полученный раствор капните йода. Затем проследите, выпадет ли осадок. Вступая в реакцию с йодом, этанол образует нерастворимое вещество, имеющее желтый окрас, йодоформ. Метанол же осадка не дает и остается совершенно прозрачным.

Способ №4. В небольшое количество спирта добавьте несколько кристаллов марганцовки, затем нагрейте порозовевший раствор. Если начнут выделяться пузырьки газа, что перед вами не что иное, как метиловый спирт.

Способ №5. Определить химический состав спирта поможет давний народный способ. Бросьте в жидкость кусочек очищенного картофеля и оставьте на несколько часов. Если картофель приобрел розовый оттенок, значит спирт метиловый, если – синий, значит спирт этиловый.

Не стоит рассчитывать на то, что проведение выше описанных манипуляций избавит на 100% от опасности отравления метанолом. Бывают такие «таинственные» смеси, в которых чистый этиловый спирт служит некой маскировкой технического метилового.

Существуют напитки с добавками, буквально «глушащими» те признаки метилового спирта, которые должны быть очевидны при проведении проб.

Если возникают хоть какие-то сомнения относительно происхождения и качества исполнения алкоголя, в этом случае от его употребления лучше отказаться.

(: 29, средняя оценка: 5,00 из 5)
Загрузка…

Источник: https://narkologpro.ru/lechenie/etilovyj-spirt-ili-metilovyj.html

Медицинская энциклопедия – значение слова Ла́нге Про́ба

Медицинская энциклопедия - значение слова Ла́нге Про́ба

(С.F.A. Lange, род. г. 1883 г., нем. врач; син.

Ланге реакция) 1) метод обнаружения в моче кетоновых тел, основанный на появлении в этом случае фиолетового окрашивания в месте соприкосновения концентрированного раствора аммиака с мочой, предварительно смешанной с концентрированной уксусной кислотой и раствором нитропруссида натрия;

2) метод диагностики некоторых болезней нервной системы (рассеянный склероз и др.), основанный на обесцвечивании в этом случае смеси цереброспинальной жидкости с коллоидным раствором хлорного золота.

Смотреть значение Ла́нге Про́ба в других словарях

Проба — ж. немецк. опыть, испытанье, испыт, попытка, искус, искушенье; всякое действие, для узнанья качества чего-либо, для опыта, каково что, или льзя ли, можно ли; | вещь, сделанная……..
Толковый словарь Даля

Проба Ж. — 1. Проверка, испытание. // устар. Репетиция. 2. Предварительный экземпляр, образец. 3. Небольшая часть чего-л., взятая для определения качества, состава. 4. Количество весовых……..
Толковый словарь Ефремовой

Проба — пробы, ж. (от латин. probo – испытываю). 1. только ед. Действие по глаг. пробовать; испытание, проверка. Взять на пробу. . машины. 2. Небольшая часть какого-н. материала,……..
Толковый словарь Ушакова

Испытание, Опробование, Проба (металлов) — Проверка металла на чистоту для подтверждения того, что он удовлетворяет стандартам торговли на товарно-сырьевой бирже. Например, слиток очищенного золота весом 100……..
Экономический словарь

Ланге (lange) Оскар (1904-1965) — польский экономист, преподавал в Чикагском университете в 1939-1945 гг. В 1945 г. вернулся в Польшу, в 1957-1962 гг. возглавлял Экономический совет польского правительства. ……..
Экономический словарь

Оскар Ришард Ланге — (1904-1965) Ланге родился 27 июля 1904 г. в Томашов Ковалики, под Лодзем, в семье родившегося в Германии фабриканта-текстильщика, и умер 2 октября 1965 г. в лондонской больнице……..

Экономический словарь

Проба — -ы; ж.1. к Пробовать (1-2 зн.); проверка, испытание. П. ружья. П. механизма. П. голоса. Первая п. Актёрская п. Взять на пробу. П. пера (о первом литературном опыте).2. Предварительный……..

Толковый словарь Кузнецова

Проба — – анализ металлов (особенно тех, которые используются для изготовления ювелирных изделий, монет или слитков) для определения их состава.
Экономический словарь

Проба Благородных Металлов — – количественное содержание золота, серебра и платины в лигатурном сплаве, из которого изготовляются ювелирные изделия и производится чеканка монет. П.б.м., принятая……..
Экономический словарь

Проба — Это слово было заимствовано из немецкого, в котором Probe восходит к латинскому probus, образованному от probare – “исследовать, пробовать”.
Этимологический словарь Крылова

Абурела Проба — (Е. A. Aburel) см. Окситоциновая проба.
Большой медицинский словарь

Авцына Проба — (А. П. Авцын) метод выявления кровоизлияний в гиперемированной конъюнктиве при сыпном тифе путем введения адреналина в конъюнктивальный мешок.
Большой медицинский словарь

Адаптационная Проба — метод раннего выявления туберкулезного хориоидита, основанный на нарушении в этом случае темновой адаптации при внутрикожном введении туберкулина.
Большой медицинский словарь

Аддиса-каковского Проба — (Th. Addis, 1881-1949, амер. врач; А. Ф. Каковский, отеч. врач) см. Каковского-Аддиса проба.
Большой медицинский словарь

Адреналиновая Проба — (син. адреналовая проба) общее название группы диагностических методов, основанных на исследовании физиологических реакций различных систем организма на введение адреналина.
Большой медицинский словарь

Адреналовая Проба — см. Адреналиновая проба.
Большой медицинский словарь

Аллена Проба — (W. М. Allen, род. в 1904 г., амер. гинеколог; син. Аллена-Хейуэрда-Пинто метод) метод изучения функционального состояния коры надпочечников, основанный на определении количества……..
Большой медицинский словарь

Аллергическая Диагностическая Проба — метод диагностики аллергических болезней или болезней с аллергическим компонентом в патогенезе, основанный на обнаружении местной или общей реакции организма на……..
Большой медицинский словарь

Аллергическая Кожная Проба — см. Кожная проба.
Большой медицинский словарь

Аллергическая Провокационная Проба — см. Провокационная проба.
Большой медицинский словарь

Амидопириновая Проба — (син.: Голло проба, пирамидоновая проба) метод дифференциальной диагностики затяжного субфебрилитета, основанный на том, что прием дробных доз амидопирина нормализует……..
Большой медицинский словарь

Проба Благородных Металлов — – количественное содержание золота, серебра и платины в лигатурном сплаве, из которого изготовляются ювелирные изделия и производится чеканка монет. В РФ для ювелирных……..
Юридический словарь

Аппликационная Проба — см. Кожная проба аппликационная.
Большой медицинский словарь

Апта-даунера Проба — (L. Apt, род. в 1922 г., амер. педиатр; Downer) метод определения происхождения крови, обнаруженной в стуле новорожденного, основанный на том, что при прибавлении щелочи материнская……..
Большой медицинский словарь

Арендта Проба — (А. А. Арендт, 1890-1965, сов. нейрохирург) метод дифференциального диагноза закрытой и открытой гидроцефалии, основанный на сравнении результатов одновременного измерения……..
Большой медицинский словарь

Антиглобулиновал Проба — антиглобулиновал пробаСм. Кумбса реакция
Словарь микробиологии

Бюрне Проба — кожно-аллергическая проба при бруцеллезе (см.).
Словарь микробиологии

Астахова Проба — (С. Н. Астахов) метод установления повышенной внушаемости и гипнабельности, основанный на том, что легкое надавливание на веки в области надбровных дуг (после соответствующего……..
Большой медицинский словарь

Атропиновая Проба — общее название методов диагностики нарушений функции различных органов и систем по их реакции на парентеральное введение атропина; применяется для тех органов и систем,……..
Большой медицинский словарь

Дерматонекротическая Проба — внутрикожное (реже подкожное) введение 0,1 -0,2 мл взвеси микробных к-р или токсинов, к-рое в положительных случаях обусловливает местное воспаление с некрозом кожи. Применяют……..
Словарь микробиологии

Источник: http://slovariki.org/medicinskaa-enciklopedia/14698

Поделиться:
Нет комментариев

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.