Грациа метод





Грациа метод



Содержание

(Этапы)

1 Этап ВЫДЕЛЕНИЕ ФАГА:Фильтрацияисследуемого материала через бактериальныефильтры, нагревание до 75°С и /или обработкахлороформом с целью устранениясопутствующей микрофлоры

2. Этап ИНДИКАЦИЯ ФАГА:полученныйфильтрат вносят: а) в пробирку с бульоннойкультурой микроорганизма (напримерE.coli)к которому мы хотим выделить вирулентныйбактериофаг; б) на чашку с МПА засеянноймикроорганизмом:


А) на жидких питательных средапросветление бульона свидетельствует о присутствии фагов Б) на плотных средах; зоны лизиса свидетельствуют о присутствии фагов

3 ЭТАП ИДЕНТИФИКАЦИЯ ФАГАвисследуемом фильтрате качественнымипробами по методам Фишера,ФюртаОтто( «стекающая капля »).



3.1 Метод Фишера (идентификация)Неизвестный фаг наносится на поверхность засеянной на МПА культуры микробаВывод :это бактериофаг E.coli 1. S.flexneri(дизентерия)2. S.sonnei(дизентерия)3.S. Typhi(брюшной тиф )4. E.coli Зона лизисаОтсутствие роста 3.2 Метод Фюрта (идентификация)Неизвестный фаг вносится в расплавленный и остуженный агар, на который штрихом засевают культуры микробаВывод : это бактериофаг S.sonnei
3.3Метод «стекающей капли» по Отто (идентификация )На чашку с МПА засевают газоном кишечную палочку и пипеткой наносят исследуемый фильтрат. Инкубация в термостате.Вывод: исследуемый фильтрат содержит бактериофаг E.coli E.coli (газон) лизис культуры

4 Этап определение количественного содержания и активности фага

Титрование этоопределение количественного содержаниябактериофагав исследуемом материале.

Для этого пользуются двумяпоказателями: количеством активныхчастиц бактериофага, содержащихся в 1мл исследуемого материала, или величинойнаибольшего разведения, при которомбактериофаг проявляет свое литическоедействие.

Полученную при этом величинувыражают отрицательным логарифмом 10,где степень указывает разведение фага.

4.1Определение титра активностифага в жидкой питательной среде(пробирках) по Аппельмануосновано навнесении различного количества титруемогобактериофага в бульон, засеянный однойи той же дозой культуры гомологичныхмикробов, с целью получения феноменабактериофагии.



Разве-дения фага 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 10-9 10-10 КК КФ
Лизис Лизис+ Лизис+ Лизис+ Лизис+ Лизис+ Лизис+ Лизис+ Лизис+ Муть- Муть— Муть— Лизис+

Результат: (+)- фаголизис индикаторного штамма ; муть -рост индикаторногоштамма

Вывод:Титр активности бактериофага равен10-8

3.2 Определение количества фага методом агаровых слоев по Грациа

Количествобактериофагов выражают в количествебляшкообразующих единиц на 1 млисследуемого материала (БОЕ / мл). Бляшки– это зоны отсутствия роста бактерийв местах нанесения фага. Для расчетасодержания количества бактериофаговв 1 мл фаголизата необходимо умножитьколичество негативных колоний в газонеиндикаторной бактериальной культурына разведение исследуемого материала.

Пример расчета: на чашкеПетри из1мл разведения 10-3образовалось 43 негативных колонии(бляшек).В 1млфаголизата содержится 43х 10 3=43000 фаговых частиц, т.еконцентрациябактериофагов в фаголизате43000БОЕ / мл

Практическое использованиебактериофагов:ВРФ выпускают бактериофаги для леченияи профилактики1) кишечных инфекций — дизентерийныйполивалентный, сальмонеллезный,брюшнотифозный, 2) гнойно-воспалительныхзаболеваний — стафилококковый,стрептококковый, синегнойный, протейный,клебсиеллезный, коли-фаг.

Разработаныи комбинированные препараты из несколькихвидов бактериофагов: коли-протейный,пиобактериофаг (против стафилококков,стрептококков, клебсиелл, протея,синегнойной и кишечной палочек),интести-фаг (против шигелл, сальмонелл,стафилококков, энтерококков, кишечнойи синегнойной палочек, протея).3.

Фагодифференцировкадля дифференциации видов бактерийcхожихпо биохимической активности (напримерсальмонелл и бактерий рода Citrobacter)

4.Фаготипированиедлявыявления источника инфекции пристафилококковых инфекциях и брюшномтифе, так как фаги штаммоспецифичныи лизируют бактерии происхождением изодного источника




Фаготипирование стафилококков набором из 21 фагов(80, 79, 52А, 52, 29, 71, 55, 3С, 3В, 3А, 53,47,42Е, 7, 6, 42Д, 77,75, 83А, 54, 81, 187).
Штамм N1 S. aureus 3В/53/81; Штамм N2 S. aureus 3В/42E/187
На штаммы S.aureus, посеянные газоном, в квадраты нанесены капли индикаторных стафилококковых фагов (21 фаг).Разные фаготипы стафилококковсвидетельствуюто разных источниках заражения, одинаковые о едином источнике. (Например, совпадение фаготипа стафилококков, выделенных из послеоперационной раны и с поверхности хирургического инструмента или с рук хирурга указывает на источник инфекции.)

Источник: https://StudFiles.net/preview/5244766/page:2/

Медицинская энциклопедия — значение слова Гра́циа Ме́тод

(A. Gratia, совр. бельг. микробиолог; син.

двухслойный метод, метод агаровых слоев)
метод титрования фага, заключающийся в определении количества активных фаговых частиц в 1 мл субстрата путем внесения образца в полужидкий агар (0,7%), содержащий чувствительную к фагу культуру, с последующим наслоением смеси на плотный агар (1,5%) в чашке Петри, термостатированием и подсчетом количества негативных колоний.

Смотреть значение Гра́циа Ме́тод в других словарях

Метод — м. и метода ж. способ, порядок, основания; принятый путь для хода, достижения чего-либо, в виде общих правил. -дический, порядочный, правильный, основательный, постепенный;……..
Толковый словарь Даля

Метод — (нов. офиц.). Сокращение, употр. в новых сложных словах в знач. методический, напр. методбюро.
Толковый словарь Ушакова

Метод М. И Устар. Метода Ж. — 1. Способ познания, подход к изучению явлений природы и общественной жизни. 2. Прием, система приемов в какой-л. области деятельности.
Толковый словарь Ефремовой

Метод… — 1. Начальная часть сложных слов, вносящая значение сл.: методический (методбюро, методкабинет, методобъединение и т.п.).
Толковый словарь Ефремовой

Аналитический Метод Прогнозирования — Метод прогнозирования, основанный на получении экспертных оценок путем логического анализа прогнозной модели.
Политический словарь

Бихевиоральный Метод — (от англ. «бихевиор» — поведение) — в политологии предполагает исследование политических явлений и процессов через анализ поведения индивидов и групп при исполнении……..
Политический словарь

Дельфийский Метод, Метод Делфи — Метод коллективной экспертной оценки, основанный на выявлении согласованной оценки экспертной группы путем их автономного опроса в несколько туров, предусматривающего……..
Политический словарь

Матричный Метод Прогнозирования — Метод прогнозирования, основанный на использовании матриц, отражающих значения (веса) вершин граф-модели объекта прогнозирования, с последующим преобразованием матриц……..
Политический словарь

Метод — — средство анализа, способ проверки и оценки знания.
Политический словарь

Метод Деструктивной Отнесенной Оценки — Метод коллективной генерации идей, реализуемый посредством двух разнесенных во время сессий, первая из которых полностью подчиняется правилам коллективной генерации……..
Политический словарь

Метод Индивидуальной Экспертной Оценки — Метод прогнозирования, основанный на использовании в качестве источника информации одного эксперта.
Политический словарь

Метод Интервью — Метод индивидуальной экспертной оценки, основанный на беседе эксперта с прогнозистом по схеме «вопрос — ответ».
Политический словарь

Метод Исторической Аналогии — Метод прогнозирования, основанный на установлении и использовании аналогии объекта прогнозирования с одинаковым по природе объектом, опережающим первый в своем развитии.
Политический словарь

Метод Коллективной Генерации Идей — Метод коллективной экспертной оценки, основанный на стимулировании творческой деятельности экспертов путем совместного обсуждения конкретной проблемы, регламентированного……..
Политический словарь

Метод Коллективной Экспертной Оценки — Метод прогнозирования, основанный на выявлении обобщенной объективированной оценки экспертной группы путем обработки индивидуальных, независимых вынесенных……..
Политический словарь

Метод Математической Аналогии — Метод прогнозирования, основанный на установлении аналогии математических описаний процессов развития различных по природе объектов с последующим использованием……..
Политический словарь

Метод Построения Прогнозного Сценария — Аналитический метод прогнозирования, основанный на установлении логической последовательности состояний объекта прогнозирования и прогнозного фона во времени при……..
Политический словарь

Метод Прогнозирования — Способ исследования объекта прогнозирования, направленный на разработку прогнозов. Примечание. Методы прогнозирования являются основанием для методик прогнозирования.
Политический словарь

Метод Психо-интеллектуальной Генерации Идей — Метод индивидуальной экспертной оценки, при котором выявление экспертной оценки осуществляется с помощью программированного управления, включающего обращение к……..
Политический словарь

Метод Управляемой Генерации Идей — Метод коллективной генерации идей с использованием целенаправленного интеллектуального воздействия (усиливающего или подавляющего) на процесс генерации идей.
Политический словарь

Метод Эвристического Прогнозирования — Аналитический метод прогнозирования, состоящий в построении и последующем усечении дерева поиска экспертной оценки с использованием какой-либо эвристики.
Политический словарь

Метод Экспертных Комиссий — Метод коллективной экспертной оценки, состоящий в совместной работе объединенных в комиссию экспертов, разрабатывающих документ о перспективах развития объекта прогнозирования.
Политический словарь

Опережающий Метод Прогнозирования — Метод прогнозирования, основанный на использовании свойства научно-технической информации опережать реализацию научно-технических достижений в общественной практике.
Политический словарь

Патентный Метод Прогнозирования — Опережающий метод прогнозирования, основанный на оценке (по принятой системе критериев) изобретений и исследовании динамики их патентования.
Политический словарь

Публикационный Метод Прогнозирования — Опережающий метод прогнозирования, основанный на оценке публикаций об объекте прогнозирования (по принятой системе критериев) и исследовании динамики их публикования.
Политический словарь

Синоптический Метод — Метод прогнозирования, основанный на анализе экспертами известного множества прогнозов объекта прогнозирования и прогнозного фона с последующим их синтезом.
Политический словарь

Системный Метод В Политологии — — рассмотрение политики как целостного, сложно организованного, саморегулирующегося механизма, находящегося в непрерывном взаимодействии с окружающей средой.
Политический словарь

Сравнительный Метод В Политологии — — сопоставление однотипных политических явлений и процессов и выявление их общих черт и специфики с целью нахождения оптимальных форм политической организации или путем решения задач.
Политический словарь

Статистический Метод Прогнозирования — Фактографический метод прогнозирования, основанный на построении и анализе динамических рядов характеристик объекта прогнозирования.
Политический словарь

Фактографический Метод Прогнозирования — Метод прогнозирования, базирующийся на использовании источников фактографической информации.
Политический словарь

Источник: http://slovariki.org/medicinskaa-enciklopedia/8480

5.3 Количественный метод — определение титра фага по методу Грациа


Анализ работы медсестры процедурного кабинета хирургического отделения стационара

Деятельность специалиста сестринского дела согласно классификации М.А. Рогового (1971) имеет различные виды работ (см. прил.6). Рассмотрим некоторые манипуляции…

Бактериофаги, особенности строения и практическое применение

3. Жизненный цикл фага

Различают фаги инфекционные, т. е. способные вызвать разные формы фаговой инфекции, и неинфекционные (вегетативные), или незрелые фаги, находящиеся еще в стадии размножения…

Бактериофаги, особенности строения и практическое применение

4. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой

По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги. Вирулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, автономно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий…

Бактериофаги, особенности строения и практическое применение

5.1 Выделение фага из объектов окружающей среды

Для получения вирулентного фага готовят фильтрат, пропуская исходный материал (вода, суспензия фекалий и др.) через бактериальные фильтры…

Бактериофаги, особенности строения и практическое применение

f5.4 Определение спектра литического действия фага

Чашку с питательным агаром делят на квадраты по числу испытуемых бактериальных культур. На каждый квадрат петлей наносят каплю соответствующей бульонной культуры и распределяют ее по агару в пределах данного квадрата…

Исследование свойств кофеина и его содержания в продуктах

1.4.2 Количественный

Кофеин в водных растворах проявляет очень слабые основные свойства, практически его растворы имеют нейтральную реакцию. С минеральными кислотами кофеин солей не образует (они сразу же гидролизуются)…

Количественный химический анализ вещества. Натрия бензоат

II. Количественный анализ препарата «Бензоат натрия» методом прямой ацидиметрии раствором 0,05 н. соляной кислоты

1. Сущность метода. Выбранный метод проведения количественного анализа препарата бензоата натрия является прямым ацидометрическим титрованием и относится к методам кислотно-основного титрования…

Контроль качества лекарственных средств с применением фотометрических методов анализа

f2.2 Количественный анализ

Прямая фотометрия наиболее простой и широко применяемый метод, пригодный для решения разных задач фармацевтического анализа, в частности для оценки доброкачественности, количественное определение активных компонентов…

Методи візуалізації в медицині. Ендоскопія

1.1 Опис методу

Ендоскопія — це метод заглядання всередину тіла та обстеження внутрішніх органів людини за допомогою медичного приладу — ендоскопа, без порушення цілісності шкірних покривів та слизових оболонок…

Методы физической реабилитации на органах брюшной полости

1.6.2 Операция по методу Bassini

Bassini — падуанский хирург, впервые провел такую операцию 24 декабря 1884 года. Его метод быстро приобрел популярность, вскоре институт Bassini в Милане сообщил о нескольких тысячах таких операций без единого осложнения в заживлении операционной раны…

Особенности фармацевтического анализа

3.2 Количественный экспресс-анализ

Количественный экспресс-анализ может быть выполнен титриметрическими или физико-химическими методами. Титриметрический экспресс-анализ отличается от макрометодов расходом меньших количеств анализируемых лекарственных форм (0,05—0…

Способы экстракции биологически активных соединений из лекарственных растений

2.3.1 Реперколяция по методу Босина

Сырье загружают в равных количествах в каждый перколятор батареи. Сырье в 1-м перколяторе экстрагируют чистым экстрагентом, в последующих — отпусками после извлечения сырья из предыдущих перколяторов…

Структура лекарственно-устойчивого туберкулеза в Минской области в 2008–2011 гг.

1.3.6 Метод посева или культуральный метод выявления M.tuberculosis

Достоверно подтвердить туберкулезную природу заболевания и изучить биологические свойства выделенного можно только при выделении культуры M.tuberculosis. Культуральное исследование следует проводить во всех случаях подозрения на туберкулез…

Ультразвукові методи функціональної діагностики

1.2 Біофізика методу

ультразвуковий ехографія променевий терапевтичний З точки зору фізики ультразвуку тканини людського тіла близькі за своїми властивостями рідкому середовищі, тому тиск на них ультразвукової хвилі може бути описано як сила, що діє на рідину…

Франклінізація і аероіонотерапія

1.1 Біофізичні основи методу

Розрізняють загальну («електричний душ») і місцеву франклінізація. Процедуру франклінізація проводять таким чином…

Источник: http://med.bobrodobro.ru/2032






Поделиться:





Нет комментариев


    Добавить комментарий


    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.